一、用途及原理
本培养基专用于FDA标准下对大肠埃希氏O157菌的选择性增菌培养。其配方中所含的蛋白胨、酪蛋白水解物和酵母浸粉为细菌提供了生长所需的基本营养成分。而磷酸氢二钠和磷酸二氢钾则用于维持培养基pH值的相对稳定。乳糖和丙酮酸钠作为碳源,有效促进大肠埃希氏O157菌的生长。为了抑制大多数革兰氏阳性菌及部分革兰氏阴性菌的生长,培养基中添加了吖啶黄素、万古霉素和头孢磺啶。
二、培养基配方(g/L)
- 蛋白胨:100g
- 氯化钠:50g
- 磷酸氢二钠:36g
- 磷酸二氢钾:15g
- 酪蛋白水解物:50g
- 乳糖:100g
- 丙酮酸钠:10g
- 酵母浸粉:60g
- 吖啶黄素:0.01g
- 万古霉素:0.008g
- 头孢磺啶:0.01g
pH值:7.2±0.2
三、配制方法
称取本品421g,加入1000ml蒸馏水中加热溶解,分装为225mL每瓶,进行121℃高压灭 sterilization 15分钟,冷却后备用。随后,将25g样品加入225mL培养基中,混匀后在37±1℃条件下培养5小时。再向培养基中加入1支mBPWp添加剂1(含吖啶黄素225mg,万古霉素18mg)和1支mBPWp添加剂2(含头孢磺啶225mg),转置于42±1℃培养18-24小时。
四、生长现象及结果观察
在36±1℃下接种以下质控菌株,培养18-24小时后观察到的生长现象如下:
质控菌株 | 菌株编号 | 接种量/CFU | 生长现象 |
---|---|---|---|
大肠埃希氏菌 | ATCC25922 | 10-100 | 浑浊 |
鼠伤寒沙门氏菌 | ATCC14028 | 10-100 | 浑浊 |
大肠埃希氏O157菌 | ATCC35150 | 10-100 | 浑浊 |
金黄色葡萄球菌 | ATCC25923 | 1000-5000 | 不生长 |
铜绿假单胞菌 | ATCC27853 | 1000-5000 | 不生长 |
以上是基于尊龙凯时品牌所提供的培养基实验现象,旨在为生物医疗领域的研究和应用提供支持。